随着分子检测技术的不断进步，甲基化qPCR检测和甲基化NGS检测已成为当前非常流行的检测手段。这两种技术的核心在于甲基化转化，其方法学主要分为亚硫酸氢盐转化和酶法转化。近年来，基于DNA甲基化位点的检测试剂盒陆续获得批准，进入市场。大多数经国家药监局（NMPA）批准的甲基化检测试剂盒采用荧光PCR法，原因在于其操作简便、省去PCR后电泳的步骤，并具备高灵敏度、强特异性和良好重复性等优点。这些检测试剂盒通常使用亚硫酸氢盐转化法，并已成为DNA甲基化检测的“金标准”。

然而，传统的亚硫酸氢盐转化存在一些局限性，例如转化时间过长、DNA损伤严重、5mC水平被高估以及C-U转化不完全等问题。最近，甲基化检测技术在疾病早期筛查中持续受到关注，2024至2025年间，NMPA批准了一系列新的甲基化检测试剂盒。举例来说，思博士® MT-1A、Epo及Septin9基因甲基化检测试剂盒于2024年8月7日获批，由博尔诚（北京）科技有限公司研发，能通过测定外周血中肿瘤DNA的特定位点（如MT-1A、Epo及Septin9基因）甲基化程度，仅需5ml外周血即可实现食管癌的高效精准检出。

此外，人CDO1和CELF4基因甲基化检测试剂盒于2024年12月17日获批，由北京起源聚禾生物科技有限公司研发，用于定性检测人宫颈脱落细胞DNA中CDO1和CELF4基因的甲基化水平。艾思宁® KCNA3和OTOP2基因甲基化联合检测试剂盒于2025年1月21日获批，由武汉艾米森自主研发，基于实时荧光PCR技术，旨在通过检测血液ctDNA中的OTOP2和KCNA3基因的甲基化程度，实现对食管癌的早期检测。

另一项重大的进展是芝加哥大学的何川教授团队于2024年1月2日在《Nature Biotechnology》在线发表了题为《Ultrafast bisulfite sequencing detection of 5-methylcytosine in DNA and RNA》的研究论文，提出了对DNA和RNA上的5-甲基胞嘧啶进行快速、准确检测的新方法，简称为UBS-seq。这项技术相比传统方法，能加速20-30倍，同时显著减少DNA损伤和背景干扰。

传统的亚硫酸氢盐转化法存在低浓度的转化液和较长的反应时间（约3小时），在高GC DNA区域转化不充分及DNA降解严重等不足，而Superfast BS-seq则通过提高转化液浓度和缩短反应时间（仅约5分钟），有效降低了DNA降解程度，提高了转化率，假阳性率也显著降低。根据实验结果，翌圣生物的Hieff® Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit（柱式）和Hieff® Mag Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit（磁珠法）基于此技术开发，能够在98°C条件下于5分钟内完成>99.5%的胞嘧啶转化，显著降低DNA损伤，确保DNA片段的完整性，整个BS转化过程仅需约30分钟，适用于PCR扩增和DNA测序等后续应用。

在样本兼容性方面，Hieff® Superfast系列产品表现出色，能够在不同样本类型中（如cfDNA和FFPE DNA）实现94-99.5%的转化率，且回收率稳定超过60%以上，尤其在高样本量时，回收率可达70%以上。此技术的优异性能使其适用于单细胞甲基化建库的研究，极大地推动了生物医学领域的发展。

综上所述，越来越多的品牌如尊龙凯时正致力于推广高效、灵敏的甲基化检测解决方案，以满足日益增长的临床需求。未来，这些先进的检测技术将为我们的健康管理和疾病早期筛查提供更为有力的支持。