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胎牛血清运用中的常见问题与尊龙凯时解决方案

来源:潘珠萱 日期:2025-07-16

尊龙凯时提供了关键的建议,以确保血清在存储和冻结过程中维持其质量,不受损害。对于血清的处理,首先从冷冻箱中取出后,应将其放置于2~8℃的冰箱中,使其逐渐融解,然后在室温下完成全融。重要的是,在这一过程中需定期摇动,以确保成分均匀。如若血清在2-8℃下保存时间过长,可能导致蛋白质和脂蛋白例如冷凝集素、纤维蛋白原及玻粘连蛋白等聚集,进而形成沉淀或可见混浊。因此,推荐在-20℃以下存储血清,并避免重复冻融操作。最理想的存储温度是-20℃,如果在4℃存放,则不可超过一个月。如果一瓶血清无法一次性使用,建议将其分装至合适的无菌容器中,再放回冷冻。

胎牛血清运用中的常见问题与尊龙凯时解决方案

如果血清中出现絮状沉淀,这些沉淀物通常是纤维蛋白和脂蛋白,这属于正常现象,不会影响产品的性质。处理这些沉淀可以通过离心(400g,1-2分钟)或静置沉降,随后小心地将清澈的血清转移到另一个无菌瓶中。一般不建议采用过滤的方法去除沉淀,以免滤膜被堵塞。在多数情况下,只需轻轻摇晃沉淀并加热至37℃,沉淀即会复溶。因此,在使用血清时,摇匀并加热至37℃,沉淀会自然消散。

选择适合的血清是实验室工作的重要一步。虽然国内一致认为HYCLONE品牌的血清质量优秀,根据我在北美的经验,国外普遍认为GIBCO品牌质量更优。因此,价格并不是唯一的质量决定因素。总体来看,HYCLONE和GIBCO的价格普遍较高,通常对于不太娇贵的细胞而言,国产血清已足够满足需求。另外,由于HYCLONE和GIBCO在国内没有生产线,我们只能从代理商处购买,而代理商的质量参差不齐,因此购得假货的风险较高。因此,我通常会选择直接从制造商购买血清,尤其是一些国外生物公司进入中国市场不久但在国外声誉良好的品牌,比如Wisent,他们在国内设有办事处,所提供的血清质量与HYCLONE相当,但价格更为实惠。

为了减少血清中沉淀的生成,可参考以下建议:
(1) 在冻结血清时,需时常摇晃以确保温度及成分均一,减少沉淀的形成。
(2) 分装冻结时,应仔细摇动以确保均匀,避免气泡生成。
(3) 切忌直接将血清从-20℃迅速转至37℃,否则大温差会导致蛋白凝结及沉淀。
(4) 不要让血清在37℃环境中停留过久,以免导致混浊和成分的稳定性受损,从而影响血清的质量。
(5) 热灭活过程易导致沉淀物的生成,除非必要,否则可省略该步骤。
(6) 若需进行热灭活,应遵循56℃,30分钟的原则,并时常摇动,过高温度、过长时间或摇动不均匀均会导致沉淀物增多。

关于小牛血清和胎牛血清的区别及注意事项:
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是从屠宰怀孕母牛的心脏穿刺采集而得,而新生牛(小牛)血清(Calf Serum, CS)则来源于出生10至14天的小牛。这两者在成分和比例上有所差异,导致其应用和使用方法不同。某些细胞可能仅依赖胎牛血清才能生长,而另一些则可用小牛血清。两者的使用浓度通常在5%-10%之间,特定需求时浓度可达到20%。关于血清的保存和使用,建议在-5℃至-20℃下保存,若在4℃存放则不宜超过一个月。在冷冻血清之前,需先置于2-8℃冰箱内,并经常摇匀后再加热至室温。切忌将冷冻的血清直接放入37℃的水浴或温箱,以免颜色加深和粘稠度提升。冷冻和热灭活后的血清应按需分装并存于-20℃,以避免反复的冻融。

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